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PCR溫度校驗儀如何校準

更新時間:2025-04-24  |  點擊率:335
  PCR溫度校驗儀是確保PCR儀溫度控制精度的關鍵設備,其校準需遵循嚴格流程。以下是校準的核心步驟及注意事項:
 
  一、校準前準備
 
  環(huán)境控制
 
  確保校準環(huán)境溫度為15-30℃,濕度≤75%RH,避免環(huán)境波動影響結果。
 
  設備需預熱30分鐘,待內部溫度穩(wěn)定后再進行校準。
 
  標準器選擇
 
  使用高精度溫度標準器(如二等標準鉑電阻溫度計或黑體輻射源),校準不確定度需≤校準儀允許誤差的1/3。
 
  示例:若校準儀允許誤差為±0.1℃,則標準器不確定度需≤0.03℃。
 
  校準點設置
 
  覆蓋PCR儀全溫區(qū)(如35-100℃),關鍵校準點包括:
 
  變性溫度(94-95℃)、退火溫度(50-65℃)、延伸溫度(72℃)。
 
  邊緣溫度點(如35℃、100℃)用于驗證線性度。
 
  二、校準步驟
 
  零點校準
 
  將溫度傳感器置于冰水混合物(0℃)中,調整設備顯示值為0.000℃,誤差需≤±0.05℃。
 
  多點校準
 
  升溫過程:從35℃開始,每5℃遞增至100℃,記錄實際溫度與顯示值的偏差。
 
  降溫過程:從100℃降至35℃,重復上述記錄。
 
  示例數(shù)據(jù):

 
  動態(tài)響應測試均勻性測試
 
  在加熱模塊上放置多個溫度傳感器(如96孔板對應位置),測量不同位置的溫差。
 
  示例:若最大溫差超過±0.5℃,需調整加熱模塊或更換傳感器。
 
  記錄設備從35℃升至95℃的升溫速率(應≥1.5℃/s),以及從95℃降至35℃的降溫速率(應≥1.5℃/s)。
 
  超調量需≤1℃,穩(wěn)定時間≤10秒。
 
  三、校準后處理
 
  結果判定
 
  溫度偏差≤±0.1℃、均勻性≤±0.5℃、動態(tài)響應符合要求,則校準合格。
 
  若不合格,需排查傳感器、加熱模塊或控制電路故障。
 
  證書與記錄
 
  生成校準證書,記錄校準日期、環(huán)境條件、校準點數(shù)據(jù)及結論。
 
  保存原始記錄至少5年,以備追溯。
 
  四、注意事項
 
  傳感器保護:避免傳感器接觸腐蝕性液體或機械損傷。
 
  定期核查:每6個月進行一次期間核查,使用核查標準(如恒溫油槽)驗證穩(wěn)定性。
 
  法規(guī)遵循:校準需符合ISO 17025、CNAS-CL01等實驗室認可要求。
 
  通過以上步驟,可確保PCR溫度校驗儀的準確性,從而保障PCR儀溫度控制的可靠性。
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